Résumé
L'ADN simple-brin télomérique est le substrat de la ribonucléoprotéine appelée télomérase, une enzyme nécessaire à la réplication du télomère qui est surexprimée dans la majorité des cellules cancéreuses et qui participe au processus de tumorigenèse. Cette ribonucléoprotéine a donc un rôle très important dans la vie cellulaire car elle contrôle la durée de vie d'une cellule en allongeant l'extrémité télomérique des chromosomes. Elle est très étudiée dans de nombreux laboratoires et des méthodes ont été mises en place pour étudier de façon précise l'activité de la télomérase. Par exemple, le telomeric repeat amplification protocol (TRAP) est un test très utilisé dans des laboratoires spécialisés dans le but de détecter l'activité de la télomérase. Ce test est composé de trois grandes étapes. En effet, il faut dans un premier temps faire l'addition de répétitions télomériques par la télomérase puis effectuer une amplification par PCR des produits de l'élongation (seul le plus court produit de l'élongation est représenté) et pour finir une analyse sur gel PAGE et un traitement de ce dernier pour la visualisation des résultats.
L'activité de la télomérase dans la lignée cellulaire 293 (cellules humaines embryonnaire de rein) sera mise en évidence au cours de cette séance de travaux pratiques.

- Introduction
- Matériel et méthode
- Résultats et discussion

Extrait du document
La détermination de la concentration cellulaire de la suspension se fait grâce à une cellule de Malassez qui permet dans un petit volume connu de liquide et à l'aide d'un microscope photonique le comptage des cellules. Après ce dénombrement, les extraits protéiques cellulaires nécessaires à la suite de la manipulation sont obtenus et ceci grâce à différentes manipulations.

Mots-clés:PCR, SYBR GREEN, lignée cellulaire, hybridation, extrait protéique, concordance, ADN

Résumé
Une étude à l'échelle cellulaire d'un limbe foliaire montre trois types de cellules différenciées à l'ultrastructure fondamentalement différente : les cellules du mésophylle, les cellules épidermiques et les cellules conductrices des sèves. Ces différents types cellulaires coopèrent tous pour assurer la fonction de nutrition de la plante entière, fonction qui est au service de la croissance et du développement en particulier des organes qui assurent la reproduction sexuée. On obtient alors un paradoxe : l'existence de plusieurs cellules pour une seule et unique fonction.

I. Les cellules du mésophylle et la photosynthèse
II. Les cellules de l'épiderme et les échanges gazeux de la feuille
III. Les cellules conductrices et les échanges trophiques de la feuille avec le végétal

Extrait du document
A l'intérieur du chloroplaste, on identifie un système membranaire abondant et complexe, le système thylakoïdien. C'est à son niveau que sont localisés les pigments (chlorophylles a et b ainsi que les caroténoïdes) regroupés en unités fonctionnelles, ou photosystèmes.

Mots-clés:biologie, végétal, sels minéraux, tissu, cavitation

Résumé
La ploïdie cellulaire définit le nombre de chromosomes par cellule. On parle donc de polyploïdie dans le cas où tout le lot chromosomique serait représenté plusieurs fois. Il est reconnu que ce phénomène apparaît dans différents types de cellules eucaryotes et notamment dans les hépatocytes, cellules majoritaires du foie.
Le travail de mon équipe d'accueil vise à définir comment se forment les hépatocytes polyploïdes, quelles sont leurs fonctions au sein du foie et quelles peuvent être leur implication dans un processus de cancérisation.

1. Première partie : Présentation Du lieu de stage
2. Deuxième partie : Présentation du travail réalisé
A. Suivides lignées murines et génotypage
B. Tests de stimulation par l'EGF: Epidermal Growth Factor dans différentes conditions
C. Influence de la variation d'exprression de la protéine LKB1 sur la ploïdie hépatocytaire
D. Difficultés rencontrées
3. Troisième Partie : Conclusion personnelle

Extrait du document
A la naissance, le foie est uniquement constitué d'hépatocytes diploïdes mononucléés 2n (un noyau contenant deux fois l'ensemble du matériel génétique), soit chez l'Homme, 2*23=46 chromosomes. Au cours du développement post-natal, le foie subit un phénomène de polyploïdisation progressive qui aboutit à l'apparition d'hépatocytes tétraploïdes binucléés 2X2n (2 noyaux contenant chacun 2 copies du matériel génétique) ou mononucléés 4n (un noyau contenant 4 copies de chromosomes). Ces cellules tétraploïdes peuvent aboutir, après mitose, à des cellules octoploïdes binucléés 2X4n (2 noyaux contenant chacun 4 copies du matériel génétique) ou mononuclées 8n (un noyau contenant 8 copies de chromosomes).

Mots-clés:culture primaire, AMPK/LKB1, mononuclées, wild type, génotypage

Résumé
L'échelle microscopique est de l'ordre du micromètre, c'est à dire 10 -6m (μm). A cette échelle l'unité et la diversité se retrouvent dans les cellules, l'ADN et dans quelques autres endroits comme l'information génétique, etc.…L'échelle moléculaire, commence a faire parler d'elle avec la présence des chromosomes. Le sujet sera diviser en 2 grandes parties.
Nous allons d'abord aborder le sujet des cellules pour enchaîner sur l'ADN, la plus grosse molécule existante ; nous passerons ainsi de l'échelle microscopique à l'échelle moléculaire.

Extrait du document
Les chromosomes sont situés dans le noyau des cellules et sont composés de l'ADN. C'est lors de la division cellulaire que les chromosomes apparaissent : les deux chaînes de nucléotides
forment le chromosome, constitué de deux chromatides identiques se rejoignant en un point, le centromère. Chez l'homme il y a 23 paires de chromosomes. Les chromosomes comme les cellules possèdent aussi l'information génétique, les anomalies telles que la trisomie 21 ou le syndrome de Williams confirme cette présence de l'information génétique sous forme de gènes. Lorsque l'on étudie le caryotype d'une personne atteinte de trisomie 21 on remarque qu'au niveau de la paire de chromosomes n°21 il n'y a pas 2 mais 3 chromosomes (voir photo 5). Lorsque l'on étudie le caryotype d'une personne atteinte du syndrome de Williams on remarque que des morceaux de
chromosomes manquent.

Mots-clés:paroi, vacuole, différences, matière

Résumé
Le gène MYCN code pour un facteur de transcription, c'est un oncogène qui est amplifié dans certains cancers dont le neuroblastome. Concernant ce type de cancer, l'activation du proto-oncogène N-myc par amplification est un événement important de la genèse de ce cancer. Le nombre de copies du gène N-myc constitue même aujourd'hui le marqueur génétique de référence pour le pronostic et le traitement du neuroblastome localisé et celui métastatique de l'enfant de moins d'un an : l'amplification de l'oncogène N-myc signe une évolution défavorable de la maladie. Cette évolution passe par une surexpression des gènes cibles de cet oncogène qui participent à la progression dans le cycle cellulaire. Lors de la réalisation de ce TP trois lignées différentes sont utilisées : deux lignées issues de neuroblastomes (les lignées SH-SY5Y et IMR-32) ainsi qu'une lignée correspond à des cellules transformées de rein embryonnaire humain (la lignée 293).

I. Introduction
II. Comptage cellulaire
III. PCR en temps réel
VI. Analyse sur gel des produits de PCR
V. Quantification et ratios
VI. Interprétation des résultats
VII. Conclusion

Extrait du document
Le marquage au SYBR GREEN est un marquage non spécifique. C'est pour cela qu'en fin de manipulation et donc en fin d'élongation, il est nécessaire de faire des courbes de fusion pour savoir si l'augmentation de la fluorescence est due au produit attendu ou aux dimères d'amorces. Pour cela, une élévation de la température est effectuée ce qui créée une dénaturation du double brin d'ADN. L'ADN se retrouve donc en simple brin ce qui créé une diminution de la fluorescence (émission de fluorescence seulement lorsque l'ADN est sous forme double brin.

Mots-clés:N-myc, MYCN, RTPCR, sybre green, cancer, ADN, comptage, gène

Résumé
Dans le commerce on trouve une multitude de produits antirides. Ces produits sont conçus pour une double action.
Tout d'abord une action sur l 'épiderme :
-amélioration de l 'hydratation de la couche cornée
-amélioration de la qualité du film hydro- lipidique de surface
-augmentation de l 'épaisseur de l 'épiderme.
Une action sur le derme :
-stimulation des fibroblastes dont le rôle est de synthétiser le collagène et l 'élastine.

I. Le développement cellulaire

II. Les effets de l 'âge

III. Les crèmes antirides

IV. Opinions diverses


Extrait du document
Le dallage primaire de la peau, déjà visible chez le sujet jeune va se creuser pour donner des rides. Ce phénomène observable au niveau macroscopique résulte d 'autre phénomènes.
Il y a deux sortes de vieillissement :
- intrinsèque (= programmé dans nos gènes)
- extrinsèque (= dû au soleil et aux facteurs de l 'environnement)


Mots-clés:crème, peau, vieillisement cutané, protéine, extensibilité, collagène

Résumé
Suite à son utilisation, le cellulaire à causé plusieurs accidents ce qui a obligé les ‎autorités à ne permettre que le casque d'écoute et le mode main-libre au volant. ‎
Mais est-ce-que cette loi est réellement assez sévère pour diminuer le taux ‎d'accidents causés par les téléphones portatifs ?‎

I) Exploration
II) Problématique
III) Evaluation morale
IV) Intégration


Extrait du document
Malgré ces gestes impardonnables, le casque portatif et le mode main libre au ‎volant est toléré en France, et beaucoup d'autres pays Européen. Pourtant les ‎neurologues spécialisés dans ce domaine admettent après plusieurs années ‎d'études et d'expérimentations qu'une conversation téléphonique quelle qu'elle ‎soit, diminue de plus d'un tiers les réflexes et la concentration du conducteur. ‎Une étude de l'université de Harvard estimait en 2003 qu'une conversation ‎téléphonique causait près de 2600 morts par année sur la route, soit 6% de tous ‎les accidents mortels. ‎

Mots-clés:portable, accident, casque portatif, mode mains libres

Résumé
Le cœur est un organe creux et musculaire qui assure la circulation du sang en pompant le sang par des contractions rythmiques vers les vaisseaux sanguins et les cavités du corps.
L'automatisme cardiaque : activité rythmique spontanée du cœur due à l'existence des cellules auto-excitables (propriété d'une cellule capable de déclencher un signal électrique sans action stimulante d'une cellule voisine) du myocarde.


I) L'automatisme cardiaque
II) Le muscle cardiaque : le myocarde
III) Le tissu nodal

Extrait du document
Cette activation cardiaque se fait toujours dans un même sens. Le nœud sinusal, véritable « pace maker » biologique, crée une stimulation, un flux va se propager dans toute la masse cardiaque par le biais du nœud de Tawara et le réseau de Purkinje, mais ces « pace maker » secondaires peuvent prendre le relais en cas de « défaillance » du nœud sinusal.

Mots-clés:cœur, tissu nodal, myocarde, pacemaker, fonctionnement, sang

Résumé
Il a été démontré que la prolifération des cellules non transformée de la lignée 3T3 était dépendante du support. Il serait donc intéressant de voir si tel est le cas pour une lignée cellulaire transformée. Nos travaux ont donc été menés sur les cellules transformées de la lignée CHO, en parallèle de la lignée 3T3 afin de comparer les modes de prolifération en fonction de l'adhésion des cellules. Pour cette étude, différentes techniques d'étude du cycle cellulaire et d'imagerie ont été réalisées. Ces techniques montrent que contrairement au cellules 3T3, les cellules CHO n'ont pas besoin d'adhérer à un support pour réaliser leur cycle cellulaire, celui-ci n'est donc pas régulé par l'adhésion.

1. Matériels et méthodes
2. Résultats

Extrait du document
Lors de la culture sur Methocel, pour les 3T3 on voit que les cellules sont bloquées en G1 dès M1. La proportion de débris augmente de M1 à M3, les cellules meurent : les 3T3 sont incapables de proliférer sans support auquel adhérer. Pour les CHO, la proportion de cellules en G1 et en S est stable, il ne semble pas y avoir blocage du cycle cellulaire en G1 en condition Méthocel. De plus la proportion de débris est constamment inférieure à 5%, les cellules restent viables. Les CHO prolifèrent indépendamment de l'adhésion à un support contrairement aux 3T3.
Lors du retour sur plastique après un jour de culture en Methocel, le profil des lignés 3T3 et CHO est à peu près le même que pour la condition plastique, bien que la ligné 3T3 présente une augmentation de la proportion de cellules en phase S et en G2. Cette observation confirme l'hypothèse d'une synchronisation des cellules lors du retour plastique, suite au blocage en phase G1 des cellules en suspension.

Mots-clés:culture cellulaire, cytométrie de flux, BrDU, western blot, immunofluorescence

Résumé
François Jacob est un chercheur en biologie français. Il a notamment été le chef du service génétique cellulaire de l'institut Pasteur dans les années 1960 et a occupé la chaire de génétique cellulaire au Collège de France. En 1965, François Jacob a reçu le Prix Nobel de médecine pour ces travaux en génétique en collaboration avec André Lwoff et Jacques Monod. Cependant, François Jacob se distingue aussi par sa carrière littéraire. Auteur de plusieurs ouvrages sur la science et ses avancées, le chercheur français a été élu en 1996 à l'Académie Française. En 1996, François Jacob a publié La Souris, la Mouche et l'Homme. Dans cet ouvrage, le biologiste français retrace notamment les principales découvertes de la biologie lors de la seconde moitié du XXème siècle tout en proposant une réflexion sur la science et sa place dans la société moderne.

Extrait du document
Du fait de son rôle dans la société, la biologie est devenue l'objet d'accusations diverses, notamment à propos de la sélection humaine. François Jacob rappelle que l'idée d'améliorer la reproduction humaine est ancienne : déjà Platon voulait limiter les naissances chez les pauvres !

Mots-clés:mutation, cellulaire, génétique, homme, société, expérience